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技術文章
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細胞轉染是將外源性基因導入細胞內的一種技術
2022-12-31
細胞轉染是將外源性基因導入細胞內的一種專門技術。隨著基因與蛋白功能研究的深入，轉染目前已成為實驗室工作中經常涉及的基本方法。常規(guī)轉染技術可分為兩大類,一類是瞬時轉染,一類是穩(wěn)定轉染。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中,因此一個宿主細胞中可存在多個拷貝數,產生高水平的表達,但通常只持續(xù)幾天,多用于啟動子和其它調控元件的分析。一般來說，超螺旋質粒DNA轉染效率較高，在轉染后24-72小時內（依賴于各種不同的構建）分析結果，常常用到一些報告系統(tǒng)如熒光蛋白，β半乳糖苷酶等來幫...
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溶酶體是細胞內的消化器官
2022-12-21
溶酶體（Lysosomes）是動物細胞中重要的細胞器,其存在的完整性與動物生理病理均密切相關。溶酶體是真核細胞中為單層膜所包圍的細胞質結構，內部pH4～5，含豐富的水解酶，具有細胞內的消化功能。新形成的初級溶酶體經過與多種其他結構反復融合，形成具有多種形態(tài)的有膜小泡，并對包裹在其中的分子進行消化。因此，溶酶體具有溶解或消化的功能，為細胞內的消化器官。溶酶體染色試劑盒可以標記活細胞中的溶酶體，使之帶綠色熒光(Ex/Em=405/505nm)。本試劑盒使用染料為一種疏水性復合物，...
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RNA的提取方法總結
2022-12-09
這篇文章主要講的是幾種常用的RNA提取方法。1、異硫氰酸胍氯化銫超速離心法原理：使用蛋白質變性劑異硫氰酸胍有效抑制RNA酶的活性，經過起始密度為1.78g/ml的氯化銫介質，進行密度梯度超速離心，RNA沉淀于管底，而DNA與蛋白質在上清中。使用這種方法，不但能得到高質量的RNA，而且能同時分離出細胞染色體DNA.本法對于冷凍時間長、細胞質和細胞核不易分離的組織標本以及富含RNA酶的組織細胞(如胰腺)的RNA提取尤其適合。此法提取的RNA的質量好和成功率高，已成為提取哺乳動物細...
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轉染試劑用于提高基因實驗的效率
2022-11-30
轉染是一種將外來顆粒和核酸轉移到細胞中的技術，它可以通過化學的方式來實現。轉染試劑用于提高基因實驗的效率，從而可以在應用基因和基因組令人難以置信的功能領域進行大量研究。在所有轉染實驗中，轉染方式的選擇尤為重要。陽離子聚合物與帶負電荷的核酸序列結合，帶正電荷的復合物被細胞膜吸引并通過內吞作用整合到宿主細胞中。此類試劑包括PLGA（聚乳酸-乙醇酸共聚物），一種可安全用于轉染程序的食品級聚合物，以及PBAE（聚-β-氨基酯），一種能夠保護DNA分子的聚合物在宿主細胞內遞送。這些從P...
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微生物的培養(yǎng)方法步驟介紹
2022-11-29
微生物培養(yǎng)所培養(yǎng)的微生物通常是病菌、細菌、放線菌、真菌等，屬于生物培養(yǎng)的一種。微生物培養(yǎng)步驟：1.配置不同濃度的營養(yǎng)液稀釋液:取營養(yǎng)液1ml溶于9ml無菌水中,振蕩5min配成10%的溶液.2.將容器口靠近(注意不是對著)酒精燈燈焰用吸管從此溶液中吸取1ml加入到裝有9ml無菌水的試管中.以此類推制成1%,0.1%,0.01%等不同濃度的稀釋液.3.將試管口靠近(注意不是對著)酒精燈燈焰,左手拿試管,右手托培養(yǎng)皿(僅露一條小縫,且靠近燈焰).將溶液倒入培養(yǎng)皿中,在各培養(yǎng)皿上標...
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蛋白酶K的性質從這三個方面介紹
2022-11-27
蛋白酶K來源于林伯氏白色念球菌（TritirachiumalbumLimber），是一種與枯草桿菌蛋白酶相關的絲氨酸蛋白酶。由于它能降解角蛋白（keratin），因此被命名為蛋白酶K。它是一種高活性的廣譜蛋白酶，在變性劑尿素或十二烷基磺酸鈉（sodiumdodecylsulfonate，SDS）溶液中依然能保持較高酶活力，所以被廣泛應用于各種生物材料中的DNA或RNA的提取。蛋白酶K的性質從這三個方面介紹：一、分子結構蛋白酶K由一條肽鏈組成，包含277個氨基酸殘基，相對分子質...
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高保真DNA聚合酶的定義及如何選擇
2022-11-08
DNA聚合酶是PCR反應中*組成部分，是參與DNA復制中的重要酶，被用在生物及醫(yī)學等領域的各個研究方向上。PCR技術發(fā)明至今40多年的時間里，從早期被發(fā)現的TaqDNA聚合酶到現在，酶越來越多樣化。隨著新酶的發(fā)現和對舊酶的改造，DNA聚合酶的保真性、特異性、靈敏度等都獲得了明顯的改進。而高保真DNA聚合酶的出現正是順應了市場需求，下面小編將圍繞高保真DNA聚合酶的作用原理和應用方向等進行介紹。一、什么是什么是高保真酶高保真DNA聚合酶有聚合中心和酶切中心，聚合中心具有5'→3...
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李記生物細胞轉染試劑常見問題（一）
2022-11-07
涉及產品EZTransPlus細胞轉染試劑（Ⅱ）貨號：AC04L011EZTrans細胞轉染試劑（高效）貨號：AC04L091/AC04L092EZTrans細胞轉染試劑（低毒）貨號：AC04L098/AC04L099其他轉染產品EZTransPro細胞轉染試劑（GMP）貨號：AC04L032/AC04L033/AC04L034EZTransRNA轉染試劑貨號：AC04L051李記生物細胞轉染試劑常見問題（一）Q1：李記有3款轉染試劑，這3款有什么區(qū)別？和Li**對比效果如何...
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